液相色谱问题
用液相色谱分辨俩种紫杉醇,这俩种紫杉醇的脂溶性不一样,流动相是甲醇:水=70:30,如何设计实验,改变流动相是否有用?谢谢。
最佳答案:
两种紫杉醇属于两种化合物,用液相色谱是很容易分开的,你不需要特别设计实验,只是看你的现有条件,如果你拥有的事一台可以走梯度的HPLC,你直接走一个甲醇-水,乙醇-水,乙腈-水的体系,结果一目了然,柱子的选择上你可以参考文献,因为紫杉醇的研究已经非常的成熟了!改变流动相对分离效果有一定影响,但是影响不大,柱子的影响比较大。如果有连ms,建议你打个ms,这样再参考一下文献,就不用打核磁,基本可以确定化学式。
如果你有的只是一个能走等度比例的hplc,那我建议你查一下文献,一定能找到最好的比例,然后你设计一下其他比例,这样可以对比出哪个梯度下分离效果最好,但是我个人不喜欢这样,因为这样没有任何实际意义,就写个文章能用上,我觉得其实就是无用功!如果能帮到你请给个满意哦,如果还有疑问请继续追问!
其 他 回 答: (共3条)
1楼
你的提问不太具体,不太好回答,应该详细列出这两种的化学式,如果是手性异构的话,可使用手性分离柱,若极性差异大,可考虑反相色谱使用C18柱分离,以水,甲醇比例调整分离效果,若还是分不开,可以加入缓冲盐(磷酸二氢钾,磷酸)调整pH值,来改变pKa值,这种研发,没有什么套路,只能走一步看一步,另外,建议你先搜索一下文献CNKI,可能已经有人做出来了
2楼
这两种物质是峰分不开吗?还有什么问题?
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